瓊脂糖(Agarose),不含DNase、RNase和Protease。配制成的瓊脂糖凝膠的凝固點(diǎn)為34~38℃,熔點(diǎn)為87~89℃。常用于配制核酸分析凝膠,例如用于DNA或RNA電泳的瓊脂糖凝膠等。常使用TAE或TBE作為電泳液。
瓊脂糖凝膠的濃度和DNA電泳的分辨率及理想的電泳液參考下表。對(duì)于分辨率要求不高時(shí),使用TAE(Tris-乙酸EDTA緩沖液)和TBE(Tris-硼酸EDTA緩沖液)均可;對(duì)于分辨率要求比較高時(shí),較低濃度的膠有利于提高大分子量核酸的分辨率,此時(shí)宜使用TAE;而較高濃度的膠有利于提高小分子量核酸的分辨率,此時(shí)宜使用TBE。
膠濃度(w/v) |
分離范圍 (bp) | 電泳液 |
0.8% | 800~22,000 | TAE |
1.0% |
500~10,000 | TAE/TBE |
1.2% | 400~7,000 | TAE/TBE |
1.5% | 250~5,000 | TAE/TBE |
2.0% | 15~3,000 | TBE |